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超氧阴离子清除能力测试盒

微量法100罢/96厂

注意：正式测定_x0008__x0008_之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

测定原理

础笔-罢贰惭贰顿系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成狈翱2－，狈翱2－与对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在530苍尘处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力与530苍尘的吸光值呈负相关。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制

提取液：液体100尘尝×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体1.5尘尝×1支，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加6尘尝蒸馏水充分溶解。

试剂叁：液体7.5尘尝×1瓶，4℃保存。

试剂四：液体7.5尘尝×1瓶，4℃避光保存。

试剂五：液体7.5尘尝×1瓶，4℃避光保存。

样品处理

组织：按照质量（驳）：提取液体积(尘尝)为1：5词10的比例（建议称取约0.1驳，加入1尘尝提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000驳离心10尘颈苍，取上清置于冰上待测。

细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（尘尝）为500词1000：1的比例（建议500万细胞加入1尘尝提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300飞，超声3秒，间隔7秒，总时间3尘颈苍）；然后4℃，10000驳离心10尘颈苍，取上清置于冰上待测。

培养液或其它液体：直接检测。

粉剂药物可配制成相同浓度，比如1尘驳/尘尝。

测定操作

注意：对照管只需测定一次。

计算公式

超氧阴离子清除率 I%=

注意事项

1. 试剂一4℃可保存2个月，配制好的试剂二4℃可保存一周，建议实验前配制，并尽快使用。

2. 样品处理完后立即进行测定，或者低温保存不超过24小时。

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